可塑性成年細(xì)胞的分化可能有巨大的治療潛力，但在同一時(shí)間，它的特點(diǎn)是發(fā)展的嚴(yán)重的病理狀態(tài)，如癌癥和纖維化。在這項(xiàng)研究中，我們報(bào)告中的應(yīng)用無創(chuàng)性系統(tǒng)的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)細(xì)胞的可塑性。分析細(xì)胞阻抗剖面記錄細(xì)胞指數(shù)使用實(shí)時(shí)細(xì)胞分析儀發(fā)現(xiàn)其顯著增加治療后前列腺上皮細(xì)胞的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1。變化的細(xì)胞指數(shù)剖面平行細(xì)胞骨架改建和誘導(dǎo)上皮細(xì)胞–間過渡和細(xì)胞增殖的負(fù)相關(guān)。這種新穎的應(yīng)用這種方法表現(xiàn)出極大的潛力的阻抗為基礎(chǔ)的系統(tǒng)的無創(chuàng)性和實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞的命運(yùn)。

關(guān)鍵詞：實(shí)時(shí)細(xì)胞分析細(xì)胞可塑性上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)型- -–轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1 - F -肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架重構(gòu)

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景區(qū)簡(jiǎn)介

這一現(xiàn)象的可塑性成年細(xì)胞的分化可能有巨大的治療潛力，但在同一時(shí)間，它的特點(diǎn)是嚴(yán)重的病理狀態(tài)惡化。上皮間過渡–（IMT）是一個(gè)關(guān)鍵過程的胚胎發(fā)育，但它也發(fā)生在進(jìn)展腫瘤來源于上皮細(xì)胞（審查，見（1））。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子- 1（ββ轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子- 1）是一個(gè)重要的生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)重塑的上皮細(xì)胞。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1誘導(dǎo)一個(gè)復(fù)雜的變化的基因表達(dá)譜，從而導(dǎo)致誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯，增加細(xì)胞遷移，擴(kuò)散（2–4）。一般來說，確定質(zhì)量和數(shù)量的重構(gòu)的上皮細(xì)胞是一個(gè)復(fù)雜的問題。它通常包括定量表達(dá)的上皮細(xì)胞和間質(zhì)標(biāo)記（E -鈣粘蛋白，神經(jīng)鈣粘著蛋白，波形蛋白和），可視化骨架重建（F），遷移，入侵檢測(cè)（傷口愈合和移民通過基底膜基質(zhì)；（5））。傳統(tǒng)上，大多數(shù)的方法是根據(jù)費(fèi)時(shí)終點(diǎn)狀態(tài)分析整個(gè)細(xì)胞群，結(jié)合的技術(shù)分析單個(gè)細(xì)胞，利用流式細(xì)胞儀或數(shù)字顯微技術(shù)和圖像分析。然而，無論是情節(jié)和空間分辨率這些技術(shù)能夠登記非常小的、快速的細(xì)胞形態(tài)的變化。目前，標(biāo)記和無創(chuàng)性方法的基礎(chǔ)上的電子傳感器陣列細(xì)胞提出了監(jiān)測(cè)細(xì)胞生理學(xué)，尤其是粘附，傳播，和瞬態(tài)變化，細(xì)胞形態(tài)（6–9）。廣泛接受這一方法，正確和準(zhǔn)確地解釋這些數(shù)據(jù)的測(cè)量是至關(guān)重要的獲得精確的相關(guān)性細(xì)胞形態(tài)和表型相關(guān)的整體使用參考方法。然而，良好的描述模型應(yīng)用這一方法，不同的細(xì)胞系和各種細(xì)胞的可塑性調(diào)節(jié)的條件是失蹤。在這里，我們表明，阻抗為基礎(chǔ)的實(shí)時(shí)細(xì)胞分析儀（美）允許動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)和定量細(xì)胞重塑在轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子- 1在β上皮轉(zhuǎn)化前列腺上皮細(xì)胞。這種新穎的應(yīng)用這種方法表現(xiàn)出極大的中型吞吐量潛力的阻抗為基礎(chǔ)的系統(tǒng)的無創(chuàng)性和實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞的命運(yùn)。

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材料與方法

細(xì)胞的

1細(xì)胞取自德國(guó)微生物和細(xì)胞培養(yǎng)和培養(yǎng)在1640培養(yǎng)，輔以20%胎牛血清（兩部分），5 µ克/毫升5毫微克/毫升的轉(zhuǎn)鐵蛋白，亞，和5 µ克/毫升胰島素（公司）。該細(xì)胞系培養(yǎng)情報(bào)（熱費(fèi)科學(xué)）培養(yǎng)瓶，盤菜，在加濕的孵化器在37攝氏°大氣中5%的二氧化碳。

實(shí)時(shí)細(xì)胞阻抗分析

協(xié)會(huì)e-plates®96被用于無創(chuàng)實(shí)時(shí)測(cè)量與使用一個(gè)xcelligence時(shí)系統(tǒng)包括一軟件版本1.1（包括羅氏）。，標(biāo)準(zhǔn)的背景進(jìn)行測(cè)量是利用100μ我完整的栽培介質(zhì)。1細(xì)胞培養(yǎng)，量化，和種子中額外的100μ我種植媒體在終濃度為30000細(xì)胞每平方厘米。細(xì)胞不斷監(jiān)測(cè)每1分鐘在個(gè)45分鐘后播種，每1小時(shí)為96小時(shí)內(nèi)重組轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（微孔）處理不同濃度一式三份進(jìn)行24小時(shí)后播種的細(xì)胞。形成收縮微絲阻斷細(xì)胞松弛素乙（炭黑），用dematioideum（calbiochem）溶解在甲醇