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恒遠發(fā)布抗磷脂抗體檢測方法

閱讀次數(shù):1279   發(fā)布時間:2013/7/11 9:58:25

恒遠發(fā)布抗磷脂抗體檢測方法 
    檢測APLA*敏感試驗是1983年介紹的ACLA的檢測,后來這種方法得到不斷改進,血清、血漿均可用于分析。該方法即為酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA):用純心磷脂的無水乙醇溶液(50/11)包被聚苯乙烯反應板,4~C過夜;常規(guī)方法洗滌后,用10%的BSA封閉;加l:50稀釋的待測血清,37~C孵育30rain;洗板后,再分別加入HRP標記的抗人γ(1:1 500)、抗α(1:1 000)、抗μ(1;8 000)鏈的F(ab)2片段,37℃30min然后,OPD顯色,加終止液。492nm波長測吸光度值。結果以正常對照組平均值±2S為正常上下限。
 
    這種以心磷脂作為靶抗原的ELISA方法,由于交叉反應,ACLA可能會與其他磷脂結合。
 
    操作中應注意以下事項:避免脫補體作用(加熱血清至56℃),否則會引起假陽性結果;反復凍融樣本也會導致ACLA結合力下降;微孔板也很重要。并且,在包被心磷脂同一板上,還可通過比較加和不加β2-GPI兩微孔問的結合活性,區(qū)別β2-GPI依賴與不依賴的ACLA。
 
    流式細胞術亦被應用于ACLA的檢測,可同時檢測APLA同種型。

抗磷脂抗體包括狼瘡抗凝物質和抗心磷脂抗體。它可作為抗磷脂綜合癥中的重要自身抗體,其中抗心磷脂抗體(ACA)*為常見。可分為IgG、IgA、IgM三類。
臨床意義:
1.抗心磷脂抗體陽性提示動、靜脈血栓形成,腦血管意外發(fā)生率高達56%。
2.抗心磷脂抗體與SLE密切相關。雙型或三型陽性SLE病人均會出現(xiàn)血栓、血小板減少性紫癜、繼發(fā)性貧血等癥狀。
3.抗心磷脂抗體陽性的女性患者易發(fā)生習慣性流產。

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